Estudo da expressão citofotométrica do marcador tumoral Caspase-3 no adenocarcinoma de cólon / Citophotometric expression study of tumoral marker Caspase-3 on colon adenocarcinoma

RACIONAL: O adenocarcinoma de cólon é a segunda causa mais comum de morte por câncer em homens e mulheres, sendo responsável por mais de cinco milhões de mortes por ano. No momento do diagnóstico apenas 70% dos tumores são ressecáveis, 75% são curáveis e 25% poderão ter recorrência da doença. A apoptose é uma das responsáveis pelo equilíbrio homeostático entre as células. Durante o desenvolvimento do processo de degeneração maligna celular o desequilíbrio na apoptose é considerado um dos principais marcos neoplásicos. A caspase-3 é uma das mais importantes moléculas na apoptose, sendo sua efetora principal. Sua expressão e prognóstico têm sido relatados em vários estudos e revisões com seu papel valorizado desde o surgimento do pólipo até a sua transformação maligna, com a taxa de apoptose diminuindo progressivamente. OBJETIVOS: Avaliar a expressão citofotométrica computadorizada do marcador Caspase-3 no adenocarcinoma de cólon; avaliá-lo nas fases evolutivas na classificação modificada de Dukes e comparar sua expressão nos tumores do lado direito e esquerdo do cólon. MÉTODOS: Utilizaram-se 19 casos de câncer recuperados de blocos de parafina confirmados por hematoxilina-eosina e submetidos à técnica imunoistoquímica da estreptavidina-biotina com anticorpo policlonal anti-caspase-3. Após este processo as lâminas marcadas foram submetidas à leitura pelo sistema SAMBA com o software IMUNNO 4.00. Foram analisados três índices: marcagem (Label index), heterogeneidade e densidade óptica. Utilizaram-se a marcagem individual, avaliação da expressão do marcador e grupos definidos de tumores com classificação Dukes e pelo lado do tumor. RESULTADOS: A média do índice de marcagem da caspase-3 foi de 85,24 e da densidade óptica de 39,55. Na classificação Dukes de 12 tipos B tiveram índice de marcagem de 86,20 e a densidade óptica de 37,72 e para os 7 tipos C a área de marcagem foi de 85,66 e a densidade óptica foi de 42,71 não sendo possível identificar diferença em relação a classificação de Dukes. Quanto ao lado do tumor os 11 tumores à esquerda tiveram índice de marcagem de 86,65 e densidade óptica de 43,29 e os 8 à direita tíndice de marcagem de 83,29 e densidade óptica de 39,44 não sendo possível observar diferença estatística significante. CONCLUSÕES: A caspase-3 possui alta expressão individual revelando-se marcador de boa utilidade no estudo do adenocarcinoma de cólon e da fase pró-apoptóica da sua tumorigênese pelo seu alto grau de índice de marcagem e densidade óptica. Em relação à classificação Dukes não houve diferença entre os tipos B e C, como também em relação ao lado direito e esquerdo do cólon.

BACKGROUND: Colon adenocarcinoma is the second cause of cancer death in men and women, responsible for more than five million deaths each year. At the diagnosis, only 70% of tumors are resectable, 75% curative and 25% might have disease recurrence. Apoptosis is responsible for homeostatic equilibrium among cells. During the development of the cellular malignant degeneration, an abnormal apoptosis plays an important role in the neoplasm transformation. Caspase-3 is one of the most important molecules in apoptosis, considered as the principal executioner. Caspase-3 expression and its prognosis have been mentioned in a variety of study and revision as its role being emphasized since the onset of polyp formation until the malignant transformation, as apoptosis declines progressively. AIM: To evaluate the computerized image cytophotometric expression of Caspase-3 in colon adenocarcinoma; to evaluate in the respective phases of Dukes-modified Classification and to compare its expression on right-sided and left-sided colon tumors. METHODS: Nineteen recovery of sampled-tissue in paraffin blocks confirmed by hematoxylin-eosin and submitted to immunohistochemistry estreptavidin-biotin method using antibody polyclonal anti-caspase-3. Following this process, marked slides were submitted SAMBA reading using software IMUNNO 4.00. Three indexes were analyzed: label index, heterogeneity and optical density. Individual labeling, marker expression evaluation and predefined tumors groups under Dukes Classification and side of tumor occurrence were considered. RESULTS: The average labeling index for caspase-3 was 85,24, where as for optical density was 39,55 pixels. According to Dukes Classification, 12 type B presented labeling index of 86,20 and optical density of 37,72 and for 7 samples type C labeling index corresponded to 85,66 and optical density equals to 42,71, unable to identify the difference regarding to Dukes Classification. Regarding to the side of tumor occurrence, 11 left-sided tumors had labeling index of 86,65 and optical density of 43,29 and the 8 right-sided tumors had labeling index of 83,29 and optical density of 39,44, unable to observe significant statistical difference. CONCLUSION: Caspase-3 presents a distinct value expression, revealing as useful marker in colon adenocarcinoma study and its proapoptotic phase at the tumorigenesis due to its high labeling index and optical density. Regarding to Dukes Classification there was no difference between types B and C, as well as right and left sided-related colon tumor occurrence.

Ácido L-glutâmico na prevenção da calcificação de pericárdio bovino fixado em glutaraldeído: estudo em ratos / L-glutamic acid in the prevention of the calcification of bovine pericardial fixed in glutaraldehyde: study in rats

Objetivo: Avaliar a eficácia do ácido L-glutâmico na prevenção da calcificação do pericárdio bovino implantado no subcutâneo de ratos. Método: Utilizaram-se 54 ratos Wistar, distribuídos em seis grupos, de acordo com o segmento de pericárdio bovino implantado...

Correlação entre as lesões do tendão do músculo supr-aespinhal, a forma do acrômio e a presença de osteófitos acromioclaviculares inferiores. Estudo por ressonância magnética / Correlation of rotator cuff lesions, acromial shape and infeior acromioclavicular osteophytes. Magnetic ressonance imaging evaluation

Correlacionar lesões tendíneas do músculo supra-espinhal com a forma do acrômio e com a presença de osteófitos acromioclaviculares. Foram analisadas ressonâncias magnéticas do ombro de 100 pacientes. O diagnóstico do tensão do músculo supra-espinhal foi classificado em normal, tendinopatia, ruptura de espessura parcial ou de espessura completa. O acrômio foi classificado quanto à forma. A articulação acromioclavicular foi classificada quanto a presença de osteófitos completas. Nos 10 pacientes com acrômio tipo 3, rupturas compeltas foram observadas e, 7 (70 por cento) casos. Dentre 0s 23 pacientes com osteófitos acrõmioclaviculares inferiores, foram identiificadas 10 (43 por cento) rupturas completas E 8 (34 por cento) parciais. Apenas o acrômio do tipo 3 apresentou relação significativa com rupturas completas do tendão do músculo supra-espinhal. Osteófitos acromioclaviculares inferiores demonstraram associação com rupturas completas e parciais desse tendão.

Retalho de submucosa de intestino delgado autólogo para aumento da capacidade da bexiga: estudo experimental em cães / Small intestine submucosa as an autologous patch to enlarge bladder capacity: experimental study on dogs

OBJETIVO: Os procedimentos disponíveis para correção de lesões do trato urinário não são livres de complicações. Recentemente, uma nova opção tem sido investigada: o uso da submucosa de intestino delgado (SIS). Constituída de uma matriz extracelular que não apresenta tendências à rejeição, a SIS é capaz de permitir o crescimento de vasos sangüíneos, participar de processos de diferenciação celular e de ser resistente contra o desenvolvimento de processos infecciosos. O objetivo deste estudo foi avaliar a histocompatibilidade de um enxerto autólogo de submucosa de intestino delgado (SIS), quando utilizado para a ampliação da bexiga urinária. MÉTODO: Utilizaram-se oito cães adultos, pesando entre 10 e 15kg. Realizou-se laparotomia mediana e enterectomia de um segmento de jejuno de 10cm, localizado a 20cm da flexura duodeno-jejunal, seguida de anastomose terminoterminal. Desse segmento de intestino obteve-se, por dissecção, a camada submucosa. Após esvaziamento da bexiga por punção, fez-se uma incisão mediana de 3cm em sua parede, compreendendo todas as camadas. Um segmento de 3 x 2,5cm de SIS foi fixado às bordas da incisão com sutura contínua, laçada de fio absorvível 3.0 de poliglecaprone-25. No 30º dia de pós-operatório os animais foram submetidos à retirada da bexiga para estudo histopatológico. RESULTADOS: Não se observou reação inflamatória aguda. Reação inflamatória crônica esteve presente com graus discreto e moderado. A infiltração fibroblástica foi moderada. A presença de células gigantes de corpo estranho foi mínima. A epitelização foi satisfatória, não sendo completa em apenas um dos oito implantes. Ocorreu incorporação predominante de fibras colágenas tipo III, cuja média correspondeu a 70,7 por cento do colágeno total. A reabsorção da mucosa foi moderada em 7/8 dos implantes. CONCLUSÃO: Os resultados indicam que ocorre regeneração da bexiga, quando é utilizada a submucosa de intestino delgado como substrato. A submucosa de ...

BACKGROUND: Many materials, including organic and synthetic prosthesis, have been described as substitutes of the genitourinary tract. The most commonly used is the ileum, which has many advantages, as easy mobilization and regular vascular pattern. However, the ideal substitute for urinary tract has not been found yet. Ileocystoplasty is not a harmless procedure, and so, investigations are constantly being made to find new substitutes. Small intestinal submucosa (SIS) is an extracelular matrix that can be used as a reabsorbable scaffold for tissue engineering. It allows blood vessels ingrowth, epithelial and connective cells proliferation, induces growing factors production and acquires macro and microscopic characteristics similar to the native tissue. In the urinary tract, previous experimental studies have demonstrated that SIS promotes bladder regeneration. The aim of the present study was to evaluate the biocompatibility of an autologous SIS implant used for bladder augmentation. METHOD: Eight mongrel dogs, weighing between 8 and 15 kg, were prepared for surgery under general anesthesia. A 3cm full-thickness midline cystotomy was performed, followed by immediate augmentation with autologous small intestine submucosa patch graft. On the 30th post-operative day, the animals were re-operated and a fragment of the urinary bladder wall including its patch was removed for histopathogical study. RESULTS: All implants were well incorporated. Macroscopically, SIS could not be distinguished from the native bladder tissue. Mild adherences occurred on the anterior parietal peritoneum. No other macroscopic complications were found. Acute inflammatory response was absent, and chronic inflammatory cells were seen in mild degree. Foreign body reaction was not present, implying satisfactory biological acceptation of the SIS patch graft. Epithelialization was complete in 7/8 implants. Fibroblastic proliferation was moderate. The densitometry of collagen...

A açäo dos ácidos graxos de cadeia curta na cicatrizaçäo de anastomoses colônicas: estudo experimental em ratos / The action of short-chain fatty acids on colonic healing anastomosis: experimetal study in rats

Os ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) derivam da fermentação das fibras ingeridas na dieta e atuam como substrato das células da mucosa colônica. O presente estudo tem como objetivo avaliar a ação dos AGCC na cicatrização do cólon. Utilizaram-se 16 ratos fêmea divididos em 2 grupos de 8 animais. No grupo controle (HC) os animais foram submetidos à cirurgia de Hartmann e infusão pós-operatória de solução salina isotônica via retal por 7 dias. No grupo experimento (HA) a solução salina foi substituída por solução isosmolar contendo AGCC. Nos animais do grupo controle, a pressão média de ruptura do segmento distal do cólon foi de 128,37 mmHg, sendo este valor de 137,25 mmHg no grupo experimento (p=0,5693). A avaliação histológica em hematoxilina-eosina foi semelhante nos dois grupos estudados. A densitometria do colágeno demonstrou concentração significativamente maior de colágeno maduro (tipo I) no grupo experimento, quando comparado com o grupo controle (p=0,0094). O colágeno total também foi mais encontrado no grupo experimento, comparado-se com o grupo controle (p=0,0371). Conclui-se que os ratos submetidos à infusão intraluminal de AGCC têm maior concentração de colágeno maduro e total na linha de sutura do coto retal, quando comparados com o grupo controle.

O papel do tamanho dos poros na biocompatibilidade de duas próteses de polipropileno usadas na retopexia pré-sacra estudo experimental em cäes / The role of pore sizes in the biocompatibility of two polypropylene prosthesis used in pre-sacral rectopexy: experimental study in dogs

A sacropromonto-fixação no tratamento do prolapso retal é freqüentemente realizada através do uso de telas, suturas ou associações destas com ressecções. O objetivo deste trabalho foi comparar a reação da parede retal em contato com duas telas macroporosas de polipropileno, bem como determinar a incorporação de colágeno às telas. Dezoito cães adultos, pesando entre 10 e 15 kg, divididos em 2 grupos de 9 animais, foram submetidos à laparotomia e retopexia pré-sacra, sendo a tela fixada com pontos de fio monofilamentar de náilon 3.0. No primeiro grupo utilizou-se a tela denominada X (porosidade = 4 mm x 3 mm, espessura = 0,2 mm) e no segundo a tela de Prolene® (porosidade = 164 m x 96 m, espessura = 0,7 mm). No 30º dia de pós-operatório os animais foram sacrificados. A reação tissular foi avaliada macro e microscópicamente. Os parâmetros macroscópicos analisados foram: presença de seroma, hematoma, abscesso, fístula, estenose, aderência e não incorporação da tela...

Influência do buflomedil em retalhos cutâneos isquêmicos: estudo experimental em ratos / Influence of buflomedil on ischemic skin flaps: experimental study in rats

Drogas vasoativas têm sido empregadas na tentativa de aumentar a viabilidade de retalhos cutâneos isquêmicos. O objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos da droga vasoativa, buflomedil, na prevenção da isquemia de retalhos cutâneos em ratos. Utilizaram-se 20 ratos machos, que foram divididos em um grupo experimento (B) e um grupo controle (A). No grupo B foi administrado buflomedil na dose de 3mg/kg, via intraperitoneal a cada 12 horas por 2 dias antes da cirurgia e por 7 dias após a cirurgia. Utilizou-se um modelo de retalho cutâneo abdominal de 9 x 4cm com base cefálica. A avaliação consistiu na fluxometria a laser do retalho em pontos pré-determinados com leitura no pré e pós-operatório imediato e no 7.º dia de pós-operatório. Realizou-se análise planimétrica da área total do retalho, da área vascularizada e da área nécrotica no 7.º dia de pós-operatório. Observou-se presença de necrose inferior do retalho em todos os animais nos dois grupos. A análise estatística dos resultados obtidos não demonstrou na planimetria diferença significante entre os grupos controle e experimental. A fluxometria não apresentou diferença significante, em relação a média dos pontos, entre os dois grupos. Conclui-se que o buflomedil não é capaz de diminuir a necrose em retalhos cutâneos isquêmicos de ratos, da forma como utilizada neste experimento.